Klebsiella oxytoca jako czynnik wywołujący antybiotykowe krwotoczne zapalenie okrężnicy cd

Szczepy oxytoca z solą buforowaną fosforanem Dulbecco dodano do studzienek. Płytki inkubowano w atmosferze 5% dwutlenku węgla w 37 ° C przez 48 godzin i badano pod mikroskopem. Cytotoksyczność zdefiniowano jako zaokrąglanie komórek i śmierć komórek, jak opisano powyżej.2,8,10 Testy wrażliwości antybiotyków izolowanych szczepów K. oxytoca przeprowadzono przy użyciu Etest (AB Biodisk). Eksperymenty na zwierzętach
W doświadczeniach in vivo w modelu zwierzęcym używaliśmy samic szczurów Sprague-Dawley ważących od 180 do 200 g oraz szczepu AHC K. oxytoca (antybiotyczne krwotoczne zapalenie okrężnicy) 1, wyizolowanego ze stolca Pacjenta 1. Badano sześć grup szczurów. : grupa (11 szczurów) otrzymała klawulanian amoksycyliny i zaszczepiona AHC1 K. oxytoca; grupa 2 (8 szczurów), tylko amoksycylina-klawulanian; grupa 3 (10 szczurów), zaszczepienie tylko AHC1 K. oxytoca; grupa 4 (18 szczurów), klawulanian amoksycyliny, indometacyna i inokulacja AHC z K. oxytoca; grupa 5 (11 szczurów), tylko klawulanian amoksycyliny i indometacyna; i grupa 6 (12 szczurów), tylko indometacyna. Eksperymenty trwały 5 dni. Klawulanian amoksycyliny (Augmentin, GlaxoSmithKline) podawano dootrzewnowo dwa razy dziennie w dniach od do 5 w dawce 20 mg, a indometacynę (Liometacin, Chiesi Farmaceutici) podawano podskórnie raz dziennie w dniach 3 i 4 w dawce mg. K. oxytoca AHC zaszczepiono dostarczając ml 12-godzinnej hodowli zawierającej około 4 × 109 jednostek tworzących kolonie (CFU) na mililitr za pomocą orogastrycznej sondy żołądkowej w dniach 2 do 4 w grupach 1, 3 i 4; grupy kontrolne 2, 5 i 6 nie otrzymały K. oxytoca.
W dniu 5 eksperymentu zwierzęta zabito, a ich jelita usunięto do badania histologicznego. Próbki kału uzyskano z jelita ślepego i dystalnego jelita grubego do hodowli bakteryjnej i badania toksyny C. difficile A. Dwaj badacze, którzy nie byli świadomi przypisań do leczenia, ocenili próbki jelit pod kątem zmian histologicznych, stosując dostosowany system punktacji12 dla czterech badań histologicznych. cechy: zapalenie błony śluzowej, zmiany nabłonkowe (zdefiniowane jako utrata komórek kubkowych, anionukleoza i zwiększone tempo mitozy i apoptozy), krwotok z błony śluzowej i erozja. Możliwe wyniki zapalenia błony śluzowej były następujące: 0, brak; 1, infiltracja zrębu śluzówki przez neutrofile; 2, infiltracja warstwy nabłonkowej przez neutrofile; i 3, tworzenie ropnia krypt. Możliwe wyniki dla zmiany nabłonka i erozji były następujące: 0, brak; 1, łagodny; 2, umiarkowane; i 3, poważne. Możliwe wyniki krwawienia z błony śluzowej były następujące: 0, brak; 1, łagodny, ogniskowy; 2, umiarkowany, ogniskowy; i 3, rozproszone. Dla porównania próbki z biopsji okrężnicy uzyskane od pacjentów z krwotocznym zapaleniem okrężnicy związanym z antybiotykiem oceniano według tego samego systemu oceny. Eksperymenty na szczurach były zgodne z przepisami dotyczącymi wykorzystania zwierząt i zostały zatwierdzone przez austriackie Ministerstwo Edukacji, Nauki i Kultury.
Analiza statystyczna
Analizę statystyczną przeprowadzono z zastosowaniem dwukierunkowej analizy wariancji na rangach dla oceny histologicznej i zmiennych K. oxytoca w kale od szczurów (obecność lub nieobecność) i podawania indometacyny (niesteroidowy lek przeciwzapalny [NLPZ] ]) (obecność lub nieobecność), ponieważ dane te nie były normalnie rozpowszechniane
[więcej w: okulista bez skierowania, cialis bez recepty w aptece, teoria pięciu przemian ]
[więcej w: vigrax jak stosować, purinasin, polmed starogard gdański ]